技术简介

实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)/QRT-PCR，是指在PCR反应体系中加入荧光标记物，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过扩增曲线对未知模板进行定量分析的方法。荧光定量PCR不仅实现真正实现了绝对定量，而且具有灵敏度和特异性高，能实现多重反应、自动化程度高、无污染、实时和准确等特点。随着生物芯片技术和荧光探针定量技术的结合，荧光定量PCR在医学检测及其他各个领域中的应用前景十分广阔。

技术原理：

荧光定量PCR所使用的荧光基团可分为两种：荧光探针和荧光染料。

使用SYBR荧光染料法来进行荧光定量PCR时，我们首先在PCR反应体系中加入过量SYBR荧光染料。SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后发射一定量的荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。

Taqman探针则是利用探针与模板的特异性结合的特点，以及探针内荧光报告基团和淬灭基团的分子特性来实现对PCR进行定量检测。这种方法可以实现高灵敏度，严格针对特定碱基序列的定量实验。

应用领域

1. 临床疾病诊断

各型肝炎、艾滋病、禽流感、结核、性病等传染病诊断和疗效评价；地中海贫血、血友病、性别发育异常、智力低下综合症、胎儿畸形等优生优育检测；肿瘤标志物及瘤基因检测实现肿瘤病诊断；遗传基因检测实现遗传病诊断。

2. 动物疾病检测

禽流感、新城疫、口蹄疫、猪瘟、沙门菌、大肠埃希菌、胸膜肺炎放线杆菌、寄生虫病等、炭疽芽孢杆菌。

3. 食品安全

食源微生物、食品过敏源、转基因、乳品企业阪崎肠杆菌等检测。

4. 科学研究

医学、农牧、生物相关分子生物学定量研究。

服务内容

注：1. 提供免费的预实验，提供免费的内参组；

2. 每一个样品都包含三个实验重复。

技术优势

1. 先进的硬件设备：依托 Bio-Rad CFX96 定量PCR系统，为您提供实时荧光定量PCR全套技术服务。实验室严格分区，避免检测样品污染；

2.专业的技术团队拥有多年的荧光定量PCR实验经验，优化的引物使实验效率最大化；精湛的操作水平，让您的实验更加快速、准确；

3.真实准确的定量结果：每一个样品都包含三个实验重复；

4.本公司提供高质量、高性价比荧光定量PCR技术服务，免费提供内参基因和PCR预实验条件摸索。

服务流程(图)

高质量总RNA提取，逆转录成cDNA(此技术服务可选)——根据客户提供基因序列设计定量引物或探针——预实验优化PCR反应条件——Real-Time PCR——实验结果分析

您需要提供以下材料：

1. 新鲜的且足量的材料，或直接提供纯化好的总RNA；

2. 提供已知的基因序列，GenBank登陆号，详细参考文献，样品来源等。

（如果您尚未获取该样品该基因的序列，仅有同源物种基因信息，您可能还需要进行基因钓取实验）

您将获得以下结果：

1. 完整的实验过程报告；

2. 数据分析结果（发表级图片形式）。

交付数据及产品

1. 完整的实验过程报告；

2. 数据分析结果（发表级图片形式）。

检测结果示例：