请在线咨询或直接联系18986294316/18171096062

SMART 快构 请注册登录 http://49.234.53.21/login

基本信息

质粒图谱和多克隆位点信息

注意：

客户在我公司选择构建载体服务项目时，请自行提供母源载体。

如要使用本公司保存的母源载体时，本公司不能保证所有母源载体完全符合客户预期，也不承担由此产生的任何责任。

载体描述

      质粒是目前应用最广泛的Red同源重组质粒，该质粒含有受阿拉伯糖启动子调控的exo、bet、gam基因，其复制子为低拷贝温敏型复制子，便于质粒的消除。
与同源重组基因敲除相关的3个酶：
      1、Exo蛋白：Exo蛋白是一种核酸外切酶，单亚基的分子量为24 kD，Exo蛋白的活性形式是一种环状三聚物分子，中间有一中空的通道，通道的一端可容纳双链DNA分子，另一端只可容纳单链DNA。Exo蛋白可结合在双链DNA的末端，从DNA双链的5’端向3’端降解DNA，使DNA分子形成3’粘性末端。
      2、Beta蛋白：Beta蛋白在Red同源重组中起着决定性作用，具有介导互补单链DNA退火的功能，是一种退火蛋白，单亚基的分子量为25.8 kD。在溶液中，Beta蛋白自发地形成环状结构，紧紧地结合在单链DNA的3’突出端，防止DNA被单链核酸酶降解，并介导互补单链DNA的退火。双链DNA退火完成后，Beta蛋白从DNA双链上解离下来。
      3、Gam蛋白：Gam蛋白为16kD的多肽分子，可与RecBCD核酸外切酶结合，抑制其对外源DNA的降解作用，防止外源DNA进入细胞后被宿主降解。

      pKD46含有温度敏感型的复制起点oriR101，在３０℃培养时可以正常复制，而高于３７℃时会自动丢失。在pKD46上还含有受araB启动子调控的exo, bet, gam基因，它们通过Ｌ-阿拉伯糖诱导表达，并携带氨苄青霉素抗性基因作为筛选标记

载体序列CATCGATTTATTATGACAACTTGACGGCTACATCATTCACTTTTTCTTCACAACCGGCACGGAACTCGCTCGGGCTGGCCCCGGTGCATTTTTTAAATACCCGCGAGAAATAGAGTTGATCGTCAAAACCAACATTGCGACCGACGGTGGCGATAGGCATCCGGGTGGTGCTCAAAAGCAGCTTCGCCTGGCTGATACGTTGGTCCTCGCGCCAGCTTAAGACGCTAATCCCTAACTGCTGGCGGAAAAGATGTGACAGACGCGACGGCGACAAGCAAACATGCTGTGCGACGCTGGCGATATCAAAATTGCTGTCTGCCAGGTGATCGCTGATGTACTGACAAGCCTCGCGTACCCGATTATCCATCGGTGGATGGAGCGACTCGTTAATCGCTTCCATGCGCCGCAGTAACAATTGCTCAAGCAGATTTATCGCCAGCAGCTCCGAATAGCGCCCTTCCCCTTGCCCGGCGTTAATGATTTGCCCAAACAGGTCGCTGAAATGCGGCTGGTGCGCTTCATCCGGGCGAAAGAACCCCGTATTGGCAAATATTGACGGCCAGTTAAGCCATTCATGCCAGTAGGCGCGCGGACGAAAGTAAACCCACTGGTGATACCATTCGCGAGCCTCCGGATGACGACCGTAGTGATGAATCTCTCCTGGCGGGAACAGCAAAATATCACCCGGTCGGCAAACAAATTCTCGTCCCTGATTTTTCACCACCCCCTGACCGCGAATGGTGAGATTGAGAATATAACCTTTCATTCCCAGCGGTCGGTCGATAAAAAAATCGAGATAACCGTTGGCCTCAATCGGCGTTAAACCCGCCACCAGATGGGCATTAAACGAGTATCCCGGCAGCAGGGGATCATTTTGCGCTTCAGCCATACTTTTCATACTCCCGCCATTCAGAGAAGAAACCAATTGTCCATATTGCATCAGACATTGCCGTCACTGCGTCTTTTACTGGCTCTTCTCGCTAACCAAACCGGTAACCCCGCTTATTAAAAGCATTCTGTAACAAAGCGGGACCAAAGCCATGACAAAAACGCGTAACAAAAGTGTCTATAATCACGGCAGAAAAGTCCACATTGATTATTTGCACGGCGTCACACTTTGCTATGCCATAGCATTTTTATCCATAAGATTAGCGGATCCTACCTGACGCTTTTTATCGCAACTCTCTACTGTTTCTCCATACCCGTTTTTTTGGGAATTCGAGCTCTAAGGAGGTTATAAAAAATGGATATTAATACTGAAACTGAGATCAAGCAAAAGCATTCACTAACCCCCTTTCCTGTTTTCCTAATCAGCCCGGCATTTCGCGGGCGATATTTTCACAGCTATTTCAGGAGTTCAGCCATGAACGCTTATTACATTCAGGATCGTCTTGAGGCTCAGAGCTGGGCGCGTCACTACCAGCAGCTCGCCCGTGAAGAGAAAGAGGCAGAACTGGCAGACGACATGGAAAAAGGCCTGCCCCAGCACCTGTTTGAATCGCTATGCATCGATCATTTGCAACGCCACGGGGCCAGCAAAAAATCCATTACCCGTGCGTTTGATGACGATGTTGAGTTTCAGGAGCGCATGGCAGAACACATCCGGTACATGGTTGAAACCATTGCTCACCACCAGGTTGATATTGATTCAGAGGTATAAAACGAATGAGTACTGCACTCGCAACGCTGGCTGGGAAGCTGGCTGAACGTGTCGGCATGGATTCTGTCGACCCACAGGAACTGATCACCACTCTTCGCCAGACGGCATTTAAAGGTGATGCCAGCGATGCGCAGTTCATCGCATTACTGATCGTTGCCAACCAGTACGGCCTTAATCCGTGGACGAAAGAAATTTACGCCTTTCCTGATAAGCAGAATGGCATCGTTCCGGTGGTGGGCGTTGATGGCTGGTCCCGCATCATCAATGAAAACCAGCAGTTTGATGGCATGGACTTTGAGCAGGACAATGAATCCTGTACATGCCGGATTTACCGCAAGGACCGTAATCATCCGATCTGCGTTACCGAATGGATGGATGAATGCCGCCGCGAACCATTCAAAACTCGCGAAGGCAGAGAAATCACGGGGCCGTGGCAGTCGCATCCCAAACGGATGTTACGTCATAAAGCCATGATTCAGTGTGCCCGTCTGGCCTTCGGATTTGCTGGTATCTATGACAAGGATGAAGCCGAGCGCATTGTCGAAAATACTGCATACACTGCAGAACGTCAGCCGGAACGCGACATCACTCCGGTTAACGATGAAACCATGCAGGAGATTAACACTCTGCTGATCGCCCTGGATAAAACATGGGATGACGACTTATTGCCGCTCTGTTCCCAGATATTTCGCCGCGACATTCGTGCATCGTCAGAACTGACACAGGCCGAAGCAGTAAAAGCTCTTGGATTCCTGAAACAGAAAGCCGCAGAGCAGAAGGTGGCAGCATGACACCGGACATTATCCTGCAGCGTACCGGGATCGATGTGAGAGCTGTCGAACAGGGGGATGATGCGTGGCACAAATTACGGCTCGGCGTCATCACCGCTTCAGAAGTTCACAACGTGATAGCAAAACCCCGCTCCGGAAAGAAGTGGCCTGACATGAAAATGTCCTACTTCCACACCCTGCTTGCTGAGGTTTGCACCGGTGTGGCTCCGGAAGTTAACGCTAAAGCACTGGCCTGGGGAAAACAGTACGAGAACGACGCCAGAACCCTGTTTGAATTCACTTCCGGCGTGAATGTTACTGAATCCCCGATCATCTATCGCGACGAAAGTATGCGTACCGCCTGCTCTCCCGATGGTTTATGCAGTGACGGCAACGGCCTTGAACTGAAATGCCCGTTTACCTCCCGGGATTTCATGAAGTTCCGGCTCGGTGGTTTCGAGGCCATAAAGTCAGCTTACATGGCCCAGGTGCAGTACAGCATGTGGGTGACGCGAAAAAATGCCTGGTACTTTGCCAACTATGACCCGCGTATGAAGCGTGAAGGCCTGCATTATGTCGTGATTGAGCGGGATGAAAAGTACATGGCGAGTTTTGACGAGATCGTGCCGGAGTTCATCGAAAAAATGGACGAGGCACTGGCTGAAATTGGTTTTGTATTTGGGGAGCAATGGCGATGACGCATCCTCACGATAATATCCGGGTAGGCGCAATCACTTTCGTCTACTCCGTTACAAAGCGAGGCTGGGTATTTCCCGGCCTTTCTGTTATCCGAAATCCACTGAAAGCACAGCGGCTGGCTGAGGAGATAAATAATAAACGAGGGGCTGTATGCACAAAGCATCTTCTGTTGAGTTAAGAACGAGTATCGAGATGGCACATAGCCTTGCTCAAATTGGAATCAGGTTTGTGCCAATACCAGTAGAAACAGACGAAGAATCCATGGGTATGGACAGTTTTCCCTTTGATATGTAACGGTGAACAGTTGTTCTACTTTTGTTTGTTAGTCTTGATGCTTCACTGATAGATACAAGAGCCATAAGAACCTCAGATCCTTCCGTATTTAGCCAGTATGTTCTCTAGTGTGGTTCGTTGTTTTTGCGTGAGCCATGAGAACGAACCATTGAGATCATACTTACTTTGCATGTCACTCAAAAATTTTGCCTCAAAACTGGTGAGCTGAATTTTTGCAGTTAAAGCATCGTGTAGTGTTTTTCTTAGTCCGTTACGTAGGTAGGAATCTGATGTAATGGTTGTTGGTATTTTGTCACCATTCATTTTTATCTGGTTGTTCTCAAGTTCGGTTACGAGATCCATTTGTCTATCTAGTTCAACTTGGAAAATCAACGTATCAGTCGGGCGGCCTCGCTTATCAACCACCAATTTCATATTGCTGTAAGTGTTTAAATCTTTACTTATTGGTTTCAAAACCCATTGGTTAAGCCTTTTAAACTCATGGTAGTTATTTTCAAGCATTAACATGAACTTAAATTCATCAAGGCTAATCTCTATATTTGCCTTGTGAGTTTTCTTTTGTGTTAGTTCTTTTAATAACCACTCATAAATCCTCATAGAGTATTTGTTTTCAAAAGACTTAACATGTTCCAGATTATATTTTATGAATTTTTTTAACTGGAAAAGATAAGGCAATATCTCTTCACTAAAAACTAATTCTAATTTTTCGCTTGAGAACTTGGCATAGTTTGTCCACTGGAAAATCTCAAAGCCTTTAACCAAAGGATTCCTGATTTCCACAGTTCTCGTCATCAGCTCTCTGGTTGCTTTAGCTAATACACCATAAGCATTTTCCCTACTGATGTTCATCATCTGAGCGTATTGGTTATAAGTGAACGATACCGTCCGTTCTTTCCTTGTAGGGTTTTCAATCGTGGGGTTGAGTAGTGCCACACAGCATAAAATTAGCTTGGTTTCATGCTCCGTTAAGTCATAGCGACTAATCGCTAGTTCATTTGCTTTGAAAACAACTAATTCAGACATACATCTCAATTGGTCTAGGTGATTTTAATCACTATACCAATTGAGATGGGCTAGTCAATGATAATTACTAGTCCTTTTCCTTTGAGTTGTGGGTATCTGTAAATTCTGCTAGACCTTTGCTGGAAAACTTGTAAATTCTGCTAGACCCTCTGTAAATTCCGCTAGACCTTTGTGTGTTTTTTTTGTTTATATTCAAGTGGTTATAATTTATAGAATAAAGAAAGAATAAAAAAAGATAAAAAGAATAGATCCCAGCCCTGTGTATAACTCACTACTTTAGTCAGTTCCGCAGTATTACAAAAGGATGTCGCAAACGCTGTTTGCTCCTCTACAAAACAGACCTTAAAACCCTAAAGGCTTAAGTAGCACCCTCGCAAGCTCGGTTGCGGCCGCAATCGGGCAAATCGCTGAATATTCCTTTTGTCTCCGACCATCAGGCACCTGAGTCGCTGTCTTTTTCGTGACATTCAGTTCGCTGCGCTCACGGCTCTGGCAGTGAATGGGGGTAAATGGCACTACAGGCGCCTTTTATGGATTCATGCAAGGAAACTACCCATAATACAAGAAAAGCCCGTCACGGGCTTCTCAGGGCGTTTTATGGCGGGTCTGCTATGTGGTGCTATCTGACTTTTTGCTGTTCAGCAGTTCCTGCCCTCTGATTTTCCAGTCTGACCACTTCGGATTATCCCGTGACAGGTCATTCAGACTGGCTAATGCACCCAGTAAGGCAGCGGTATCATCAACGGGGTCTGACGCTCAGTGGAACGAAAACTCACGTTAAGGGATTTTGGTCATGAGATTATCAAAAAGGATCTTCACCTAGATCCTTTTAAATTAAAAATGAAGTTTTAAATCAATCTAAAGTATATATGAGTAAACTTGGTCTGACAGTTACCAATGCTTAATCAGTGAGGCACCTATCTCAGCGATCTGTCTATTTCGTTCATCCATAGTTGCCTGACTCCCCGTCGTGTAGATAACTACGATACGGGAGGGCTTACCATCTGGCCCCAGTGCTGCAATGATACCGCGAGACCCACGCTCACCGGCTCCAGATTTATCAGCAATAAACCAGCCAGCCGGAAGGGCCGAGCGCAGAAGTGGTCCTGCAACTTTATCCGCCTCCATCCAGTCTATTAATTGTTGCCGGGAAGCTAGAGTAAGTAGTTCGCCAGTTAATAGTTTGCGCAACGTTGTTGCCATTGCTACAGGCATCGTGGTGTCACGCTCGTCGTTTGGTATGGCTTCATTCAGCTCCGGTTCCCAACGATCAAGGCGAGTTACATGATCCCCCATGTTGTGCAAAAAAGCGGTTAGCTCCTTCGGTCCTCCGATCGTTGTCAGAAGTAAGTTGGCCGCAGTGTTATCACTCATGGTTATGGCAGCACTGCATAATTCTCTTACTGTCATGCCATCCGTAAGATGCTTTTCTGTGACTGGTGAGTACTCAACCAAGTCATTCTGAGAATAGTGTATGCGGCGACCGAGTTGCTCTTGCCCGGCGTCAATACGGGATAATACCGCGCCACATAGCAGAACTTTAAAAGTGCTCATCATTGGAAAACGTTCTTCGGGGCGAAAACTCTCAAGGATCTTACCGCTGTTGAGATCCAGTTCGATGTAACCCACTCGTGCACCCAACTGATCTTCAGCATCTTTTACTTTCACCAGCGTTTCTGGGTGAGCAAAAACAGGAAGGCAAAATGCCGCAAAAAAGGGAATAAGGGCGACACGGAAATGTTGAATACTCATACTCTTCCTTTTTCAATATTATTGAAGCATTTATCAGGGTTATTGTCTCATGAGCGGATACATATTTGAATGTATTTAGAAAAATAAACAAATAGGGGTTCCGCGCACATTTCCCCGAAAAGTGCCACCTG