技术简介

双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation， BiFC)分析技术，是由Hu等在2002年最先报道的一种直观、快速地判断目标蛋白在活细胞中的定位和相互作用的新技术。

该方法利用绿色荧光蛋白(green fluorescent protein，GFP)及其突变体的特性作为报告基因，将荧光蛋白分割成两个不具有荧光活性的分子片段，再分别与目标蛋白连接。如果两个目标蛋白因为有相互作用而靠近，就使得荧光蛋白的两个分子片段在空间上相互靠近，重新形成活性的荧光基团而发出荧光。在荧光显微镜下，就能直接观察到两目标蛋白是否具有相互作用，并且在最接近活细胞生理状态的条件下观察到其相互作用发生的时间、位置、强弱、所形成蛋白质复合体的稳定性，以及细胞信号分子对其相互作用的影响等。

该技术巧妙地将荧光蛋白分子的两个互补片段分别与不同的目标蛋白融合表达，如果荧光蛋白活性恢复则表明两目标蛋白发生了相互作用。其后发展出的多色荧光互补技术(multicolor BiFC)，不仅能同时检测到多种蛋白质复合体的形成，还能够对不同蛋白质间产生相互作用的强弱进行比较。

目前，该技术已用于转录因子，G蛋白βγ亚基的二聚体形式，不同蛋白质间产生相互作用强弱的比较以及蛋白质泛素化等方面的研究工作上。

应用领域

1. 多种蛋白质的相互作用，例如体外、病毒、大肠杆菌、酵母细胞、丝状真菌、哺乳动物细胞、植物细胞、甚至个体水平的蛋白质之间相互作用研究、亚细胞定位。

2.细胞内多个蛋白质之间的相互作用

3. 鉴别酶-底物复合物

4. 信号转导级联

5. 翻译后修饰

6. 相互作用配偶体筛选

7. 泛素与蛋白质底物共价结合的可视化研究

服务内容

技术优势

1能在显微镜下直接观察到蛋白相互作用；2、可以在活细胞中进行实时观测；3、蛋白质间的相互作用在细胞内发生，很好的模拟还原了内源性情况，避免了体外实验的假阳性/假阴性；4、能够对不同蛋白质间产生相互作用的强弱进行比较。 5、快捷、简便，适用范围广。

服务流程

双分子荧光互补载体构建——转化宿主细胞——荧光检测

您需要提供以下材料

1. 蛋白质名称、物种信息

2. 具体的实验要求

您将获得的实验结果

1. 实验报告（实验仪器、试剂、方法、结果、结论）

2. 荧光检测结果照片等

结果图片示例