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拟南芥转基因

服务内容:

1 将目的基因片段构建至植物载体中; 2 将构建好的质粒转化农杆菌GV3101或EHA105; 3 农杆菌介导遗传转化、筛选(花序侵染);T0代种子筛选;T1代阳性苗的PCR鉴定。

技术简介

农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌,它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物的受伤部位(受伤处的细胞会分泌大量酚类化合物,从而使农杆菌移向这些细胞),并诱导产生冠瘿瘤或发状根。

根癌农杆菌和发根农杆菌中细胞中分别含有Ti质粒和Ri质粒,其上有一段T-DNA,农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后,可将T-DNA插入到植物基因组中,并且可以通过减数分裂稳定的遗传给后代,这一特性成为农杆菌介导法植物转基因的理论基础。

将目的基因片段构建到植物表达载体上(改造过的Ti质粒),转入农杆菌后T-DNA会与一系列Vir蛋白结合,在农杆菌侵染宿主时,目的基因的T-DNA片段会在该系列蛋白作用下转入宿主细胞并整合到宿主基因组内,从而实现转基因。

应用领域

农杆菌介导的拟南芥转基因研究成为研究基因功能的重要手段该技术可以使重组生物增加人们所期望的新性状培育出新品种;是开展植物基因工程研究的经典方法。

服务内容

项目分类

服务内容

植物载体构建

将目的基因片段构建至植物载体中

农杆菌转化

将构建好的质粒转化农杆菌GV3101或EHA105

转基因拟南芥筛选鉴定

农杆菌介导遗传转化、筛选(花序侵染)T0代种子筛选;T1代阳性苗的PCR鉴定

1. 拟南芥品种:哥伦比亚

2. 根据不同的载体系统及待转基因的特性,有时转基因植株生长周期会发生变化;如果待转基因为败育、致死或发育、开花相关基因,我们不能保证实验结果及周期。

3. 因待转基因特性具有不确定性,且实验周期较长,自2015年8月1日起的新订单,如果遇到个别实验失败,无法筛得阳性株,仍需酌情收取30%实验基础费用,敬请理解。

技术优势

1. 专业技术平台。从事多年转基因植物的技术团队,多种转化技术手段保证实验成功率。

2. 高效的实验机制。全年不间断种植转基因受体,随时开展转基因实验项目。

3. 提供实验全程进展,提供遗传转化、筛选的部分图片和T0代转基因苗外源基因PCR检测等琼脂糖凝胶电泳图。

服务流程(图)

载体构建——农杆菌转化——花序侵染——分批收取种子及筛选(T0)——T1代阳性苗的PCR鉴定

 

服务周期

1. 等待野生型拟南芥开花批次(每半月一批)/ 载体构建及农杆菌转化周期

2. 花序侵染(T0) 30天

3. 分批收取种子及筛选(T1) 40天

4. 真叶期移栽及T1代苗PCR鉴定 20天

5. T1代阳性苗収种 60天

您需要提供以下材料:

1. 目的基因的模板与载体构建方案

2. 尽可能详细的实验信息与其他要求

您将获得以下结果:

1. 遗传转化与筛选的部分图片;

2. T1代转基因苗外源基因PCR检测的琼脂糖凝胶电泳图;

3. T1代转基因苗及其种子。(3个阳性株系)

实验结果图片示例

 

 

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