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酵母表达

服务内容:

酵母表达外源基因具有一定的翻译后加工能力,收获的外源蛋白质具有一定程度上的折叠加工和糖基化修饰,性质较原核表达的蛋白质更加稳定,适合于表达真核生物基因和制备有功能的表达蛋白质。

技术简介

酵母表达系统兼有原核和高等真核系统的优点,已广泛用于外源蛋白的表达, 其优势表现在:1. 表达水平高,既可在胞内表达,又可分泌型表达; 2. 发酵工艺成熟,易放大;3. 外源蛋白基因遗传稳定。一般外源蛋白基因整合到毕赤酵母染色体上,随染色体复制而复制,不易丢失; 4. 作为真核表达系统,毕赤酵母具有真核生物的亚细胞结构,具有糖基化、脂肪酰化、蛋白磷酸化等翻译后修饰加工功能。因此,酵母表达系统为蛋白的生理活性研究提供了强有力的工具。

 

应用领域

酵母表达外源基因具有一定的翻译后加工能力,收获的外源蛋白质具有一定程度上的折叠加工和糖基化修饰,性质较原核表达的蛋白质更加稳定,适合于表达真核生物基因和制备有功能的表达蛋白质。

服务内容

服务项目

服务内容

基因合成和基因亚克隆, 原核表达载体构建

可为客户免费提供密码子优化服务,

公司载体库覆盖不同酵母表达载体,可满足客户不同需求:分泌表达(如pPICZaA 、pGAPZaA、pPIC9K等)或胞内表达(如pPICZA 、pPIC3.5K、pESC-系列等)

酵母宿主菌转化

提供毕赤酵母转化服务

目的蛋白表达

培养条件优化(培养基,菌体密度,甲醇浓度,诱导时间等),提高目标蛋白的表达量。可根据客户需求进行目的蛋白小量表达,也可大量表达

目的蛋白纯化和浓缩

多步纯化获得目的蛋白,可对包涵体复性后获得

目的蛋白检测

SDS-PAGE、Western Blot、质谱等多种检测方法对目的蛋白分析检测

技术优势

1. 公司专业的技术团队拥有多年的蛋白表达纯化实验经验,规范的蛋白表达纯化实验平台确保客户的实验更高效。

2. 免费为客户提供实验可行性分析报告,五千多种常见蛋白表达条件数据库,对蛋白表达的预测成功率高达75%。通过生物信息学分析及水平优化,活性蛋白表达率上升30%。

3. 公司丰富的载体库,覆盖各种商业化表达载体,并可根据客户实际需求改造表达载体,不同的大肠杆菌宿主菌也可满足客户常规需求,为蛋白表达提供最高效率。

服务流程

蛋白表达分析优化报告——表达载体构建——转化宿主菌——优化培养诱导条件——蛋白小量表达及可溶性鉴定——蛋白大量表达、纯化——检测分析

 

您需要提供以下材料

1 待表达蛋白的基因序列以及待表达蛋白的基本特性(蛋白来源为分泌蛋白还是胞内蛋白,天然蛋白是否存在翻译后修饰,蛋白是否稳定,蛋白的pI值等)。

2 所需纯化蛋白的量及用途,要求的纯度、是否需要带标签以及带何种类型的标签。

3 发货的具体要求:如缓冲液要求,是否冻干等。

您将获得的实验结果

1. 实验过程中涉及到的蛋白编码基因克隆的测序报告;

2. 蛋白诱导表达的Western blot或SDS-PAGE检测报告;

3. 实验过程中所涉及到的重组细菌菌株和重组酵母菌株、目的基因质粒及亚克隆质粒;

4. 提供客户要求量的纯化或浓缩的重组蛋白样品。

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